Skip to content

szpital zachodni grodzisk mazowiecki rehabilitacja

4 miesiące ago

675 words

Otrzymane lizaty komórkowe analizowano za pomocą WB z kozim anty-C3 pAb (górny panel) lub króliczym anty-C3a pAb (dolny panel). W warunkach redukujących. C3, iC3b i iC3 (MA), 20 ng; lizaty komórkowe, obciążone 4 × 105 równoważników komórek. Reprezentant 3 niezależnych eksperymentów. (D) Lizaty wytworzone z komórek Farage inkubowanych z C3 (MA) osobno lub z FH i FI przez wskazany czas analizowano pod względem wychwytu i CA przez WB z króliczym anty-C3a pAb. Zmniejszanie warunków. C3, 70 ng; C3a, 30 ng; lizaty komórkowe, obciążone 4 × 105 równoważników komórek. Reprezentant 2 niezależnych eksperymentów. (E) Schemat przedstawiający cięcie i inaktywację C3 (H2O) uzyskanego z CA. Eksperymenty te przeprowadzono również z fibroblastami i otrzymano te same wyniki. Następnie załadowaliśmy komórki Farage C3 (H2O) w obecności FH i FI i znaleźliśmy produkty rozszczepienia w lizatach zgodne z CA. Gdy komórki Farage inkubowano z samym C3 (MA) lub C3 (MA) z FI, nie wykryliśmy fragmentacji, ale oczekiwaną nienaruszoną C3. i . łańcuchy (Figura 6C), sugerując, że CD46 eksprymowana przez Farage nie służyła jako kofaktor dla pośredniczonego przez FI rozszczepiania obciążonego C3 (MA). Jednakże, w obecności załadowanego FI i FH, obserwowaliśmy rozszczepienie za pośrednictwem kofaktora C3 (MA). Oznacza to, że inkubacja wszystkich 3 z komórkami Farage dała w wyniku przewidywane fragmenty rozpadu, tj. Fragment p-41 i fragment zatrzymujący C3a, który migruje przy około 75 kDa (fig. 6C). Te fragmenty są identyczne z oczyszczonym iC3 (H2O) (Figura 6, C i E). Odkąd WB użył kozła Ab, które nie odróżnia go od wędrowania. łańcuch (75 kDa) z C3a (1 (72 kDa) (fig. 6C), sondowano również próbki króliczym poliklonalnym Ab skierowanym przeciw C3a i zweryfikowano obecność C3a (1 (Figura 6C). Wymóg dodania egzogennego FH i FI do CA sugerował, że hodowane komórki Farage nie syntetyzują ani nie zawierają endogennych zapasów tych białek, które są dostępne dla załadowanego C3 (H2O). Przebieg czasowy C3 (H2O). degradacja łańcucha wskazywała, że nie ma pękania C3 (MA), dopóki nie zostaną załadowane FH i FI (Figura 6D). Ponadto CA rozpoczyna się szybko (~ minuta) i kończy się 30 minut. Badania te przeprowadzono również z fibroblastami i otrzymano te same wyniki. Dane te wskazują, że komórki pobierają FH i FI i że białka te mogą pośredniczyć w rozszczepianiu wewnątrzkomórkowym obciążonego C3 (H2O). C3a jest generowany z załadowanego C3 (H2O) i jest zwiększany przez aktywację komórek. Oprócz degradacji przez CA, drugi los naładowanego C3 (H2O) ma przyczynić się do wytworzenia C3a. Ponieważ poprzednie doniesienia opisują wewnątrzkomórkową generację C3a (4, 11), zbadaliśmy, czy wygenerowano C3a po pobraniu z C3 (H2O). Wewnątrzkomórkowe C3a wykryto w spoczynkowych komórkach Farage a 15 minut po ekspozycji na NHS, a jego wytwarzanie stopniowo zwiększało się w ciągu 2 godzin (Figura 7A). Wytwarzanie C3a z załadowanego C3 (H2O) można było wykryć w wielu typach komórek (nie pokazano). Chociaż nie udało się wykryć generacji C3a przez WB przy braku wychwytu, w poprzednich badaniach wykryto niewielką ilość C3a za pomocą cytometrii przepływowej z wewnątrzkomórkowych magazynów w komórkach nieobjętych C3 (H2O) (4). Wskazuje to, że istnieją 2 źródła wewnątrzkomórkowych zapasów C3, tj. C3a może być generowany po pobraniu C3 (H2O) z krwi lub z syntetycznych magazynów C3. W zgodzie z tym ostatnim, wykryliśmy mRNA C3 w badaniu linii komórkowych (Suplementalna Figura 6). Dodatkowo obserwowano wytwarzanie C3a po pobraniu oczyszczonego C3 (MA), co wskazuje, że jest to spowodowane rozszczepieniem wewnątrzkomórkowym, a nie wynikiem innych czynników w surowicy lub aktywności konwertazy (nie pokazano). Jako kolejny dowód na to, że wychwyt nie jest zależny od konwertazy, pokazujemy wychwyt w obecności EDTA (dodatkowa Figura 7). Figura 7 Wytwarzanie wewnątrzkomórkowego C3a z naładowanego C3 (H2O) jest wzmacniane po aktywacji komórek
[podobne: kiełki słonecznika, jarmuż właściwości, rozpiska na siłownie ]

0 thoughts on “szpital zachodni grodzisk mazowiecki rehabilitacja”

  1. Moja corka2latka ma wraz zapalenie oskrzeli czy podczas tej choroby można ją kąpać