Skip to content

stomatolog gdańska 3 warszawa

4 miesiące ago

95 words

Lizaty komórkowe z komórek Farage inkubowanych w 10% NHS we wskazanych punktach czasowych analizowano pod kątem wytwarzania C3a metodą WB. Aby określić, czy aktywacja komórki moduluje wytwarzanie C3a, komórki Farage (B) inkubowano na anty-IgM. lub płytki powleczone BSA lub limfocyty T CD4 + (C) inkubowano na anty-CD3 / CD46. lub powlekane płytki MOPC-31 . przez 3 godziny w obecności 10% NHS. Otrzymane lizaty komórkowe oceniano pod względem produkcji C3a metodą WB. Densytometryczne skanowanie produkcji C3a jest wyrażone jako średnia. SD w dolnych panelach. n = 3. 4 z co najmniej 2 niezależnych eksperymentów. * P <0,05, dwustronny test ucznia. (A. C) Warunki redukujące. C3a, 30 ng; lizaty komórkowe, obciążone 2 × 105 równoważników komórek. Aby rozszerzyć tę obserwację i zbadać znaczenie biologiczne, zapytaliśmy czy modulacja C3a z obciążonego C3 (H2O) została zmodulowana w aktywowanych komórkach. Komórki Farage inkubowano na płytkach powleczonych anty-IgM . lub pokrytych BSA (bez aktywacji) przez 3 godziny w obecności 10% NHS. Otrzymane lizaty komórkowe analizowano pod kątem wytwarzania C3a przez WB z króliczą pAb do C3a. W porównaniu z nieaktywowanymi kontrolami, generowanie C3a znacznie wzrosło w aktywowanych komórkach Farage (Figura 7B). Wskazuje to na potencjalnie ważną rolę wychwytu C3 (H2O) i późniejszego wytwarzania C3a w aktywacji i funkcjonowaniu komórek B. Aby określić, czy to zjawisko ma szersze znaczenie, zbadaliśmy generację C3a aktywowanymi komórkami T CD4 +. Komórki T CD4 + inkubowano przez 3 godziny na płytkach powleczonych anty-CD3 / CD46y lub płytkach pokrytych MOPC-313 (bez aktywacji) w obecności 10% NHS. Wytwarzanie C3a oceniano przez WB z pAb królika na C3a. Podobnie jak w przypadku linii komórkowej Farage, wytwarzanie C3a znacząco wzrosło w aktywowanych komórkach T CD4 + w porównaniu z nie aktywowanymi kontrolami (Figura 7C), a przy braku NHS generowanie C3a nie było wykrywalne przez WB (nie pokazano). Zatem zaobserwowany wzrost C3a wytworzony w warunkach aktywacji pochodzi z załadowanego C3 (H2O). Mechanizm zależny od CTSL do wytwarzania C3a z wewnątrzkomórkowych zapasów C3 w limfocytach T CD4 + został wcześniej opisany (4), reprezentując jeden mechanizm do wytwarzania C3a z załadowanego C3 (H2O). Na poparcie tego zademonstrowaliśmy wytwarzanie C3a z C3 (MA) przez CTSL in vitro (Suplementowa Figura 8A). Dodatkowo, wykazaliśmy bardziej wydajne cięcie C3 (MA) w porównaniu z natywnym C3 przez CTSL in vitro (Suplementowa Figura 8B). Ponieważ proteaza odpowiedzialna za wytwarzanie C3a z C3 (H2O) jest prawdopodobnie specyficzna względem typu komórki, wykazano również rozszczepienie C3 (H2O) przez elastazę (dodatkowa postać 8C) i granzyme B (dodatkowa postać 8D). Absorpcja C3 (H2O) moduluje wytwarzanie cytokin z komórek T CD4 +. Wcześniejsze prace dowiodły, że przemieszczenie wytworzonej wewnątrzkomórkowo C3a (z C3aR) na powierzchnię komórki powoduje prozapalny fenotyp (wytwarzanie IFN-y) przez limfocyty T CD4 + (4). Ponieważ wykryliśmy generację C3a z obciążonego C3 (H2O), który był zwiększony po stymulacji komórek T CD4 + (Figura 7C), badaliśmy wpływ poboru C3 (H2O) na wytwarzanie cytokiny Th1 / Th2 przez stymulowane limfocyty T CD4 +. Stymulowaliśmy limfocyty T CD4 + przez receptor komórek T (mAb OKT-3) i CD46 (mAb TRA-2-10) w obecności / nieobecności C3 (H2O) i oceniano produkcję 4 cytokin zaangażowanych w odpowiedź lub kurczenie Th1. Wykryliśmy indukcję IL-6 w obecności wychwytu C3 (H2O), który był znacząco zwiększony przez usieciowanie receptora komórek T (Figura 8). Wynik ten był specyficzny dla C3 (H2O), ponieważ oczyszczone C3b nie zwiększało wytwarzania IL-6. Dane te podkreślają jeden przykład tego, w jaki sposób szlak recyklingu C3 (H2O) przyczynia się do obrony immunologicznej. Wytwarzanie IL-6, cytokiny o działaniu plejotropowym, może wpływać na odpowiedź immunologiczną, a także regulować procesy metaboliczne i regeneracyjne (21) [podobne: klasterowe bóle głowy, kobalamina, kiełki słonecznika ]

0 thoughts on “stomatolog gdańska 3 warszawa”