Skip to content

gambit lubawka pl

3 miesiące ago

668 words

Wynika to z faktu, że wewnątrzkomórkowe gromadzenie C3 zostało zidentyfikowane u osobników z niedoborem C3 (4, 32. 35), jak również w liniach komórkowych, które zostały długo usunięte ze źródła C3 (4). Jednym potencjalnym źródłem jest oczywiście biosynteza i przechowywanie C3. Zgodnie z tym, wykazaliśmy mRNA C3 w badanych liniach komórkowych (dodatkowa figura 6). Chociaż większość C3 jest wydzielana, wykazano, że niektóre typy komórek przechowują C3, takie jak ludzkie neutrofile (36) i monocyty (37). Pochodzenie i skład tych sklepów C3 nie zostały określone. To, czy te sklepy mają nakładające się lub odrębne role od tych ustanowionych przez ładowanie C3 (H2O), wymaga dalszych badań. Z perspektywy czasu, gdy próbowaliśmy zrozumieć biologiczną funkcję wychwytu C3 (H2O), rozważaliśmy prostą koncepcję, że C3 (H2O) może być oryginalną bramą do aktywacji układu dopełniacza w komórkach, na błonach i w śródmiąższu. W tym scenariuszu domniemana kluczowa wrodzona rola immunologiczna wychwytu C3 (H2O) do wewnątrzkomórkowych magazynów C3 ma pomóc w szybkiej reakcji gospodarza na niebezpieczeństwo. Tak więc, związki C3 w komórce i w tkance śródmiąższowej są łatwo dostępne do generowania C3a i innych fragmentów w celu zainicjowania zasadniczej i szybkiej lokalnej aktywacji dopełniacza w miejscu urazu lub inwazji patogenu. Rzeczywiście, taki mechanizm mógł być jednym z najwcześniejszych i najszybszych wrodzonych mechanizmów obrony immunologicznej, pozostałością adaptacyjną zachowaną w czasach współczesnych. Wreszcie, nasze dane i inne najnowsze badania poszerzają teraz rolę nowo odkrytego ICS (4, 11). Odkrycie szlaku C3 (H2O) -recyklingu ma ważne znaczenie dla naszego zrozumienia podstawowych procesów, które komórka wykorzystuje do homeostazy i obrony. Dane te mogą również sugerować potencjalne nowe cele terapeutyczne i strategie. Właśnie zaczynamy odkrywać ten złożony, intrygujący i ważny nowy system. Metody Linie komórkowe, Abs i białka. Ludzki chłoniak z komórek B Farage i linie komórkowe ludzkich białaczek T Jurkat (ATCC) hodowano w RPMI 1640 z 10% dezaktywowanym termicznie FBS, 100 jednostek / ml penicyliny i 100 .g / ml streptomycyny. Linię komórek nabłonka siatkówki ARPE-19 (ATCC) hodowano w DMEM: F12 z 10% dezaktywowaną termicznie FBS, 100 jednostek / ml penicyliny i 100 .g / ml streptomycyny. Pierwotne fibroblasty skóry (ATCC) hodowano w podstawowej pożywce uzupełnionej zestawem Fibroblast Growth Kit. Low (ATCC). Ludzkie HUVEC (ATCC) hodowano w podstawowej pożywce komórek naczyniowych uzupełnionej zestawem Endothelial Cell Growth Kit (ATCC). Wszystkie linie komórkowe utrzymywano w 37 ° C w 5% CO2. Królicze anty-ludzkie C3a (A218) i kozie anty-ludzkie C3 (A213) pAb uzyskano od firmy Complement Technologies. Kurczak anty-ludzki C3 (GW20073F) pAb pochodzi z Sigma-Aldrich. Oczyszczone ludzkie C3 wytworzono w domu (38) lub zakupiono od firmy Complement Technologies (A113). Oczyszczone ludzkie serotypy C3b (A114), C3a (A118), FH (Al37) i FI (Al38) oraz C3-dpl (A314) zakupiono od firmy Complement Technologies. MAb anty-a 2MR (MA-8G1) stosowane do cytometrii przepływowej i eksperymenty blokowania zakupiono od Molecular Innovations. Ab dla aktywacji limfocytów B (koza F [ab.] 2 anty-ludzkie IgM, 2022-01) zakupiono od SouthernBiotech. Abs dla stymulacji komórek T CD4 + wytworzono w domu (anty-CD3, OKT-3 lub anty-CD46, TRA-2-10) (39). Izolacja i aktywacja ludzkich limfocytów. Pierwotne ludzkie limfocyty izolowano z próbek krwi pełnej. Limfocyty B wyizolowano z PBC przy użyciu zestawu MACS B Cell Isolation Kit II (Miltenyi Biotec). Limfocyty T CD4 + izolowano za pomocą zestawu do izolacji komórek T CD4 + EasySep dla ludzi (StemCell Technologies). Komórki T CD4 + (1 do 1,5 x 105 komórek / studzienkę) aktywowano przez 3 godziny w obecności 10% NHS lub 10% FBS na 96-studzienkowych płytkach hodowlanych pokrytych Abs na CD3 i CD46 (2 ug / ml) Wytwarzanie cytokin przez aktywowane limfocyty T CD4 + oceniano za pomocą zestawu BD Cytometric Bead Array (CBA) Human Th1 / Th2 Cytokine Kit II. Komórki Farage B (1 do 1,5 x 105 komórek / studzienkę) aktywowano przez 3 godziny w obecności 10% NHS lub 10% FBS na 96-studzienkowych płytkach hodowlanych powleczonych anty-IgM (10 (ig / ml). Przygotowanie lizatu komórkowego. Lizaty komórkowe przygotowano przez ponowne zawieszenie komórek w buforze do lizy komórkowej (1% NP-40, 0,05% SDS, w PBS) z 2 mM PMSF i Prote
[więcej w: kalprotektyna, kobalamina, kaspofungina ]

0 thoughts on “gambit lubawka pl”

  1. [..] Oznaczono ponizsze tresci z artykulu oryginalnego: apteczka pierwszej pomocy[…]