Skip to content

Autoimmunologiczny zespół limfoproliferacyjny z mutacjami Somatic Fas cd

1 miesiąc ago

492 words

Hybrydyzację oligonukleotydów przeprowadzono jak opisano poprzednio 8 w 3 ° C poniżej temperatury topnienia oligonukleotydu. Opisy wszystkich sekwencji oligonukleotydowych i warunków PCR są dostępne na żądanie. Wyniki
Identyfikacja Mutacji Fas
Tabela 2. Tabela 2. Mutacje apoptozy Fas i heterozygotycznej Fas u sześciu pacjentów z autoimmunologicznym zespołem limfoproliferacyjnym (ALPS) typu III i trzech pacjentów z ALPS typu Ia. Przebadaliśmy sześciu pacjentów z cechami fenotypowymi ALPS (Tabela 1), ale z normalnymi poziomami apoptozy za pośrednictwem komórek F aktywowanych fitohemaglutyniną T (Tabela 2) i bez rodzinnej historii ALPS. Jednak ze względu na silne powiązanie między nadmiarem podwójnie ujemnych limfocytów T a defektem apoptozy za pośrednictwem Fas11, szukaliśmy mutacji genu Fas w sortowanych FACS podwójnie ujemnych komórkach T od tych pacjentów i odkryliśmy mutacje heterozygotycznych Fas w wszystkie sześć (tabela 2). Donorowe i akceptorowe splicingowe mutacje egzonu 8 zidentyfikowano odpowiednio u Pacjenta i Pacjenta 6, a mutację w miejscu splicingowego egzonu 7 u Pacjenta 5 (Tabela 2). Oczekuje się, że mutacje te doprowadzą do splicingu odpowiedniego egzonu na RNA. Pacjent 2 miał nonsensowną mutację w eksonie 8, a pacjent 3 miał mutację missense w eksonie 9 (D244V); Pacjent 4 miał delecję 8 bp w eksonie 9 prowadząc do przedwczesnego kodonu stop w pozycji 227 (tabela 2). Identyczne mutacje Fas lub mutacje prowadzące do identycznych zmian w strukturze Fas zostały opisane u pacjentów z ALPS typu Ia (Tabela 2) i wykazano, że są dominującymi.14,15 Szukaliśmy również mutacji Fas w posortowanym podwójnym negatywnym T komórki z pięciu zdrowych, dopasowanych wiekowo kontroli i nie znalazły żadnego.
W przeciwieństwie do wyników z oczyszczonymi podwójnie negatywnymi limfocytami T, zmutowanych produktów Fas nie można było wykryć metodą PCR przeprowadzoną na DNA z komórek blastycznych komórek T, które zostały aktywowane in vitro przez dziewięć dni pod wpływem fitohemaglutyniny.
Ekspresja Mutant Alleles
Figura 1. Figura 1. Analiza ekspresji mutacji Fas w aktywowanych komórkach T i oczyszczonych podwójnie negatywnych komórkach T od pacjenta i pacjenta 2. Panel A pokazuje wyniki amplifikacji Fas-PCR Fas w podwójnie ujemnych komórkach T w spoczynkowe jednojądrzaste komórki krwi obwodowej i komórki T aktywowane fitohemaglutyniną. Panel B pokazuje sekwencje eksonu 8 genomowego Fas otrzymane z oczyszczonych podwójnie negatywnych limfocytów T i limfocytów T aktywowanych fitohemaglutyniną. Panel C pokazuje analizę FACS wartości procentowych podwójnie ujemnych komórek T (CD3 + receptor komórek T [TCR] . / . + CD4-CD8-) w spoczynkowych komórkach jednojądrzastych krwi obwodowej i komórkach T aktywowanych fitohemaglutyniną.
Analizowano ekspresję zmutowanych alleli w limfocytach T od Pacjenta i Pacjenta 2. Nieprawidłowy produkt amplifikacji RT-Fas DNA, jak również oczekiwany produkt o normalnej wielkości, wykryto w cDNA otrzymanym z spoczynkowych komórek jednojądrzastych krwi obwodowej (Figura 1A). Sekwencjonowanie tych produktów RT-PCR ujawniło sekwencję typu dzikiego i nieprawidłowy produkt, w którym brakowało egzonu 8 (danych nie pokazano). Pominięcie egzonu 8 w informacyjnym RNA Fas może być konsekwencją mutacji nonsensownych i splicingowych w DNA podwójnie negatywnych limfocytów T odpowiednio od Pacjenta i Pacjenta 2 (Tabela 2)
[patrz też: zespół dravet, stolec owczy, kruczenie jelit ]
[podobne: rozpiska na siłownie, kaki kalorie, olx leżajsk ]

0 thoughts on “Autoimmunologiczny zespół limfoproliferacyjny z mutacjami Somatic Fas cd”

  1. [..] odnosnik do informacji w naukowej publikacji odnosnie: błąd lekarski odszkodowanie[…]